隆丁蛋白质区分的测定
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下一篇 2008-03-09 11:05:43
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1 原理
高分子含氮物质在酸性溶液中,易为单宁所沉淀。磷钼酸可同时沉淀高、中分子含氮物质。低分子含氮物质则不为上述物质所沉淀。因此,光测单宁沉淀样品后所得的滤液的含氮量,从总氮减去此值即得高分子氮。再测磷钼酸沉淀样品后所得滤液的含氮量即为低分子氮。用单宁沉淀样品所得滤液的含氮量减去低分子氮,即为中分子氮。
2 仪器
2.1 总氮测定仪(同麦芽中总氮测定仪器)
2.2 恒温水浴
20±0.1℃
3 试剂:
3.1 总氮测定用试剂
3.2 硫酸,密度1.4(100g 98%硫酸加入92克水)
3.3 单宁溶液
溶16g单宁于100ml水中。
3.4 钼酸钠溶液
溶50g钼酸钠于100ml水中。
4 操作:
4.1 先测总氮,方法见(库尔巴哈值的测定4.1 总氮测定)
4.1.1 用单宁沉淀
A.加100ml样品(使其内含约80mg左右氮)于一200ml容量瓶中,加水到180~185ml,加密度1.4硫酸4ml,摇匀。
B.置容量瓶于20℃水浴中,保温15~20min,加10ml单宁溶液,加水到刻度,摇匀,立即用折叠滤纸过滤,此滤液可重复过滤,直至澄清。
C.取滤液50.0ml,用定氮仪测其总氮。
4.1.2 用磷钼酸沉淀
A.加100ml样品(使其内含约80mg左右氮)于一200ml容量瓶中,加水到175ml左右,加10ml钼酸钠溶液,摇匀。
B.置容量瓶于20℃水浴中,保温15~20min,加10ml密度1.4硫酸,加水到刻度,摇匀,立即用折叠滤纸过滤,此滤液可重复过滤,直至澄清。
C.取滤液50.0ml,用定氮仪测其总氮。
5 计算
三个区分中氮含量分别为:
A(N,mg/100ml)=
B(N,mg/100ml)=
C(N,mg/100ml)=
三个区分中含氮量分别为
A区分=
B区分=
C区分=
式中:P——100ml样品中含氮量 mg;
T——用单宁沉淀后50ml滤液中氮量 mg;
M——用磷钼酸沉淀后50ml滤液中氮量 mg;
A——100ml样品中高分子氮含量 mg;
B——100ml样品中中分子氮含量 mg;
C——100ml样品中低分子氮含量 mg;
V——取样体积
ml 。
6
结果表示:以%表示之,取一位小数。
7 正常范围:
A区分:25%左右
B区分:15%左右
C区分:60%左右
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sgxwwy
发布于2008-03-11 11:23:53
-
仅供参考
A区分=(麦汁总氮量--单宁沉淀滤液总氮量)/麦汁总氮量*100%
B区分=(单宁沉淀滤液总氮量--钼酸钠沉淀滤液总氮量)/麦汁总氮量*100%
C区分=钼酸钠沉淀滤液总氮量/麦汁总氮量*100%