糖化力的测定
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下一篇 2008-03-09 10:55:08
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1原理
用麦芽浸出液的糖化酶水解淀粉，生成含有自由醛基的单糖或双糖，醛糖在碱性碘液中定量氧化为相应的羧酸。剩余的碘，酸化后以淀粉作指示剂，用标准硫代硫酸钠溶液滴定。
2仪器
a．糖化仪：应满足麦芽汁制备工艺要求，并附有温度计和搅拌器；
b．搅拌器：转速80～100r/min
c．高精度恒温水浴：精度±0.1℃
d．分析天平：感量0.1mg
e．容量瓶：200ml
f．碘量瓶：150 ml
g．胖肚吸管：100、50、25ml
h．移液管：5ml，分度值0.05ml
I．滴定管：25 ml
3试剂和溶液
a．乙酸-乙酸钠缓冲液：
称取醋酸30g，用水溶解，并定容至1000ml；另称取醋酸钠（Na2C2H3O2•3H2O）34g，用水溶解，并定容至500ml；将这两种溶液混合；
b．氢氧化钠[c（NaOH）=1mol/l] ：按GB601配制；
c．硫酸溶液[c (1/2H2SO4)=1mol/l] ：按GB601配制；
d．硫代硫酸钠[c(Na2S2O3)=0.1mol/l]
称取硫代硫酸钠24.82g和四硼酸钠7.6g，溶于300～400ml除二氧化碳的水中，并定容至1000ml，按GB601进行标定；
e．碘标准溶液[c (1/2I2)=0.1mol/l]
按GB601配制；
f．百里酚酞指示5 g/L：称取百里酚酞0.5 g用95%乙醇溶解，并定容至100ml；
g．
淀粉溶液 20g/L：称取于105℃烘干2h的可溶性淀粉10.0g，用少量的冷水调成糊状，在不断搅拌下注入400ml沸水中，将残余淀粉糊用少许水洗入沸水中，继续煮沸5min，迅速冷却至20℃，并定容至500ml。
4
操作步骤
a．麦芽浸出液的制备
称取细粉样品20.0g（准确至0.1g）于一已知重量的糖化杯中，加入20℃的水480ml，将糖化杯放入40±0.1℃的水浴中，在不断搅拌下保温1h。取出糖化杯，冷却至20℃，用20℃的水冲洗搅拌器，擦干糖化杯外壁。再加入20℃的水，使其重量为520.0g。搅拌均匀后，用双层滤纸过滤，弃去最初200ml，随后的50ml供分析用。
b．糖化
⑴
于四个200ml容量瓶中各吸入淀粉溶液100.0ml。1、2号容量瓶中各加入乙酸-乙酸钠缓冲液5.00ml，将四个容量瓶放入20±0.1℃水浴中保温20min；
⑵
先于1号容量瓶中加入麦芽浸出液5.00ml，60s后于2号瓶中加入麦芽浸出液5.00ml，立即计时摇匀，将1、2号容量瓶放入20±0.1℃水浴中保温30min（保温时间从加入麦芽浸出液算起）；
⑶于1、2号容量瓶中立即各加入1mol/l氢氧化钠4.00ml，3、4号容量瓶各加入1mol/l氢氧化钠溶液2.35ml，然后再各加入麦芽浸出液5.00ml，摇匀；
⑷将四个容量瓶用水稀释至刻度，用百里酚酞指示液检查应呈蓝色。
c．测定
分别吸取四个容量瓶中的反应液50.0ml于四个150ml碘量瓶中，加入0.1mol/l碘液25.0ml和1mol/l氢氧化钠溶液3.0ml，加塞，于暗处放置15min。各瓶加入1mol/l硫酸溶液4.5ml，用0.1mol/l硫代硫酸钠标准溶液滴定至蓝色消失。
5
结果的计算
X13＝
式中：X15——100G无水麦芽糖化力，WK；
X2——同一样品麦芽的商品水分，%；
V1——空白滴定消耗硫代硫酸钠标准溶液的毫升数，（3、4号瓶的平均值），ml；
V2——样品滴定消耗硫代硫酸钠标准溶液的毫升数，（1、2号瓶的平均值），ml；
c——
硫代硫酸钠标准溶液的浓度，mol/L；
342——转换系数。
6允许差
平行试验之差不大于15WK。
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